Meridian 的 Lyo-Ready 基因分型直接 qPCR 血液
- 使用直接扩增协议进行超灵敏检测，可检测到小于 1 个拷贝。
- 耐受全血、血清和血浆中的 PCR 抑制剂。
- 紧密的荧光团块具有清晰的等位基因区分度，非常适合难辨别的 SNP。
- 可作为液体或冻干样品使用，是高通量或 POC 检测的理想选择。
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说明
SNP（单核苷酸多态性）或点突变是最常见的遗传变异类型，是个体间表型多样性的主要组成部分。一旦通过测序确定了单个 SNP，它们就可用于药物遗传学、评估和预测病人对治疗的反应和不良事件的风险，或用于诊断，如囊性纤维化筛查。SNPs 的临床筛查需要大规模的多重基因分型，传统上需要从血液等复杂样本中提取 DNA，以实现灵敏的 DNA 扩增。然而，血液中含有多种 PCR 抑制剂，会抑制反应或降低反应效率。
Meridian 的 Lyo-Ready Genotyping Direct qPCR Blood 是一种抗 4 倍抑制剂的混合物，专为高特异性、高灵敏度的序列变异基因分型扩增而设计，即使在血液、血清或血浆中存在 PCR 抑制剂的情况下也能提供卓越的聚类分辨率和清晰的等位基因鉴别，即使是具有挑战性的 SNP 目标也不例外。此外，它还可以液态或冻干形式使用，以创建环境温度稳定的检测方法，使其成为护理点 (POC) 设备的理想选择。
目录和手册
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常见问题：Lyo-Ready 基因分型直接 qPCR 血液
什么是等位基因歧视？
等位基因鉴别是指对特定基因位点的两种或多种序列变化进行鉴别的方法。通常，一个等位基因（”野生型 “DNA 序列）是常见的，而另一个等位基因（突变）是罕见的。在 SNP 中有 3 种基因型：- 二倍体同源基因（两个野生型等位基因 (PP)）、二倍体同源基因（两个突变型等位基因 (pp)）和杂合子（一个野生型等位基因和一个突变型等位基因 (Pp)）。
为什么要筛查 SNPs？
SNP（单核苷酸多态性）有助于预测个人对某些药物的抗药性或易感性（药物遗传学）、对毒素等环境因素的易感性以及患病风险。单核苷酸多态性还可用于追踪与疾病相关的基因变异在家族中的遗传情况。
使用 qPCR 进行基因分型有哪些优势？
qPCR（实时 PCR）可让您筛选已知的 SNP。qPCR 的优点是简便、准确，并可扩展到高通量。生物信息分析也没有测序和微阵列等其他技术那么复杂。
5′-nuclease (TaqMan) 等位基因分型法使用一对引物扩增目标区域，并使用两个等位基因特异性探针检测目标 SNP 等位基因，报告样本的基因型。与普通 qPCR 不同的是，基因分型只在 PCR 结束时测量荧光水平，并将结果显示在散点图上，这样就可以并行运行和分析数百个检测项目。
全血中存在哪些 qPCR 抑制剂？
免疫球蛋白 G 是血液中 qPCR 的主要抑制剂，因为它能与单链基因组 DNA 结合，导致 Ct 值增加和信号降低。血液中的另外两种主要抑制剂是血红蛋白和乳铁蛋白，它们会影响 DNA 聚合酶的活性，从而降低扩增效率。血红蛋白和血红蛋白也会导致一些荧光淬灭，尤其是 FAM。此外，用于稳定血液样本的抗凝剂（如乙二胺四乙酸二乙酯、柠檬酸盐或肝素）中也可能存在抑制剂。
冻干混合物和液体混合物的反应条件是否相同？
是的，Lyo-Ready 基因分型直接 qPCR 血液可以作为液体混合物使用，也可以冻干后在环境温度下保存，无需改变反应条件，而且冻干/保存不会影响检测灵敏度。
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