Meridian 的尿嘧啶 DNA 糖基化酶
- 优化的 dTTP 与 dUTP 比率可实现高灵敏度和特异性。
- 效率高，在多重 qPCR 检测中表现出色。
- 缓冲液系统最大限度地提高了 PCR 扩增的效率，无需长时间优化，节省了时间、精力和成本
- UDGase 还提供不含甘油、高浓度和耐热的产品。
高效、灵敏地处理 DNA 病毒
使用高通量 dUTP qPCR 混合液（MDX031）以及 Parvovirus B19 和尿嘧啶 DNA 糖基化酶引物和探针（MDX054），对从灭活的粗病毒裂解液中扩增 10 倍序列稀释的 Parvovirus B19 进行了测试。扩增曲线中显示了四次重复，说明了高通量 dUTP qPCR 混合液的重现性、效率和灵敏度。
说明
尿嘧啶 DNA 糖基化酶（UDG）能催化含尿嘧啶的单链或双链 DNA 释放尿嘧啶，但不能催化 RNA 或寡核苷酸（6 个或更少碱基）释放尿嘧啶。UDG 在很宽的 pH 值范围内都有活性，最适 pH 值为 8.0，不需要二价阳离子，但会受到高离子强度（>200 mM）的抑制。
规格
| 说明 | 尿嘧啶 DNA 糖基化酶（UDG）可去除单链和双链 DNA 糖分子中的尿嘧啶残基，但不会破坏磷酸二酯骨架，从而防止其用作杂交靶标或 DNA 聚合酶的模板。UDG 不会去除 RNA 中的尿嘧啶。 |
| 浓度 | 尿嘧啶 DNA 糖基化酶，MDX054 = 1 U/µL 溶于 50% 甘油中
|
| 单位定义 | 一个单位是指每分钟催化含尿嘧啶的双链 DNA 释放 60 pmol 尿嘧啶的酶量。活性是通过在 37 °C 下 30 分钟内，在含有 0.2 毫克 DNA（104-105 cpm/mg）的 50 µL 反应混合物中释放[3H]-尿嘧啶来测量的。 |
| 来源 | MDX054 是重组大肠杆菌菌株，带有过度表达的尿嘧啶 DNA 糖基化酶修饰基因。 |
| 产品规格 | 无色透明溶液 |
| 10 倍反应缓冲液 | 0.25 M Tris-Cl，1 mM EDTA，10 mM DTT，pH 8.0。 |
| 应用 | 高通量、PCR、qPCR |
| 样品类型 | cDNA, DNA |
| 演示文稿 | 2 瓶 |
| 存储 | -20 °C |
| 混合稳定性 | 见外标签 |
| 功能 | dUTP PCR 产物在加入 UDGase 后会发生降解，从而在琼脂糖凝胶上形成单一而明显的条带。 |
| DNA 污染 | 在大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特异性目标的 PCR 扩增中未检测到与阴性对照重叠的痕迹。 |
| DNase 污染 | 检测不到降解 |
目录和手册
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常见问题尿嘧啶 DNA 糖基化酶
尿嘧啶 DNA 糖基化酶是如何工作的？
在 PCR 过程中，可能会出现 DNA 合成过程中尿嘧啶错结合或 DNA 链中胞嘧啶自发脱氨基的情况。UDG 酶能催化尿嘧啶核碱基（dUTPs）的切除，防止突变，从而进行有针对性的、更可靠的 PCR 检测。
UDG 酶和 UNG 酶有什么区别？
UDG 指的是一个超家族的酶，包括以尿嘧啶-N-糖基化酶基因命名的称为 UNG 的 I 族 UDG 酶，因此 UDG 酶（UDGase）和 UNG 酶这两个术语通常可以互换使用，因为它们在 qPCR 中具有相同的功能，即防止携带污染。
尿嘧啶 DNA 糖基化酶能去除 RNA 中的尿嘧啶吗？
尿嘧啶 DNA 糖基化酶 (UDG) 可催化含尿嘧啶的单链或双链 DNA 释放尿嘧啶，但不能催化 RNA 或寡核苷酸（6 个或更少碱基）释放尿嘧啶。
Uracil DNA 糖基化酶在哪个 pH 值范围内具有活性？
UDG 在很宽的 pH 值范围内都具有活性，其最佳 pH 值为 8.0，不需要二价阳离子，但会受到高离子强度（>200 mM）的抑制。
尿嘧啶 DNA 糖基化酶在什么温度下失活？
UDG 酶的活性低于 55°C，因此这应该是 qPCR 扩增的最低退火温度，以避免新合成的含 dU 的 qPCR 产物降解。
如何检测尿嘧啶 DNA 糖基化酶的纯度？
对尿嘧啶 DNA 糖基化酶的纯度（在 SDS-PAGE 凝胶上运行）、是否存在内切酶、缺口酶、外切酶和 RN 酶进行检测。
尿嘧啶 DNA 糖基化酶的来源是什么？
尿嘧啶 DNA 糖基化酶来自携带过表达修饰 UDG 基因的重组大肠杆菌菌株。
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