Meridian 的 Lyo-Ready 高通量 dUTP qPCR 混合液 基质混合液
- 优化的 dTTP 与 dUTP 比率可实现高灵敏度和特异性。
- 效率高，在多重 qPCR 检测中表现出色。
- 防止携带 qPCR 污染。
高效、灵敏地处理 DNA 病毒
使用高通量 dUTP qPCR 混合液以及 Parvovirus B19 的引物和探针测试了从灭活的粗病毒裂解液中扩增 10 倍序列稀释的 Parvovirus B19。扩增曲线中显示了四次复制，说明了高通量 dUTP qPCR 混合液的重现性、效率和灵敏度。
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说明
高通量 dUTP qPCR 混合液包含 Taq DNA 聚合酶、反应缓冲液、dNTP、MgCl2、稳定剂和 PCR 增强剂。不过，dNTP 混合液中的部分 dTTP 已被 dUTP 取代，因此可以加入尿嘧啶 DNA 糖基化酶 (UDGase) (MDX054) 来清除 qPCR 污染。这使得高通量 dUTP qPCR 成为开放式、自动化、高通量仪器上多重检测的理想选择。
规格
| 说明 | qPCR 混合液含有 Taq 聚合酶、反应缓冲液、dNTP/dUTP 混合液和MgCl2，用于去除背景 PCR 产物污染。 |
| 浓度 | 2 x |
| 外观 | 无色透明溶液 |
| 热启动 | 抗体介导 |
| 应用 | 高通量 qPCR |
| 样品类型 | cDNA, DNA |
| 演示文稿 | 1 瓶 |
| 存储 | -20 °C |
| 混合稳定性 | 见外标签 |
| 一致性 | 测试样本和参照样本之间的 ± 0.5 Ct 差异 |
| DNase/RNase 污染 | 在大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特异性目标的 PCR 扩增中未检测到，与阴性对照有重叠痕迹。 |
| DNase 污染 | 检测不到降解 |
目录和手册
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常见问题：高通量 dUTP qPCR 混合液
什么是携带 qPCR 污染？
由于 qPCR 可以扩增微量 DNA，因此防止污染至关重要，因为即使是微量的 qPCR 污染也会产生假阳性。qPCR 交叉污染包括来自其他样本的交叉污染、来自实验室其他地方的污染，以及来自先前 qPCR 实验中使用的扩增产物和引物的携带 qPCR 污染。后者是 qPCR 中出现假阳性结果的主要原因。防止污染很困难，因此必须制定实验室程序，确保一次检测的 DNA 不会在后续检测中再次扩增。
尿嘧啶 DNA 糖基化酶如何用于 qPCR？
Uracil DNA 糖基化酶可特异性地降解已通过 qPCR 过程并含有 dUTP 的产物，使用于扩增的原生核酸模板保持完整。Uracil DNA 糖基化酶的激活是 qPCR 的第一步，在 50°C 孵育 2 分钟，然后在热启动激活过程中温度升至 95°C 时 Uracil DNA 糖基化酶就会变性。
UDG 和 UNG 有什么区别？
尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG 或 UDGase）是由六个亚家族组成的酶家族。家族 I 的 UDGase 酶被称为 UNG（尿嘧啶-N-糖基化酶基因），因此没有区别，UDG 和 UNG 这两个词通常可以互换使用，因为它们在 qPCR 中具有相同的功能，即防止携带 qPCR 污染。
为什么不是所有 qPCR 检测都使用 dUTP？
使用这种技术并不总能完全消除杂质，尤其是在 PCR 产物长度较短的情况下，这在 qPCR 检测中很常见。此外，特别是当初始样本只含有一个或几个目标分子时，UDG 的加入可能会降低扩增效率，从而延迟检测，降低灵敏度。
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