缓冲区

它含有 5´- 3´ DNA 聚合酶活性和强大的链置换活性,但缺乏 5´- 3´外切酶活性。强大的链置换活性使 Bst DNA 聚合酶能在恒定温度下合成 DNA,因此是等温扩增(包括 HDA、MCA 和环路介导 DNA 等温扩增(LAMP))的理想酶。

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Application: Specimen Type: Concentration: High Concentration: NoWet: No
Glycerol-Free: NoLyo-Ready: Air-Dryable: Dryable: Sustainability:

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目录和手册

等温扩增(如环介导等温扩增,LAMP)是一种可在单一温度下进行的 DNA 扩增技术。LAMP 目前被认为是最强大的等温扩增技术之一,它依赖于链置换聚合酶和四到六种引物。这些引物可识别目标 DNA 中的几个特定区域,其中两个引物可形成环状结构,以促进后续几轮扩增,产生大量 DNA。

Meridian 的 Bst 聚合酶具有很强的链置换活性,聚合速度快,与专用的耐抑制剂反应缓冲液一起使用时,可增强对抑制剂和盐的耐受性。100 倍高浓度、不含甘油的 BST 酶专门设计用于最大限度地提高 LAMP 诊断测试开发的测定灵活性。

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常见问题:Taq HS DNA 聚合酶

如果我的 PCR 检测受到太多 PCR 抑制剂的阻碍,我该如何优化?
降低模板浓度有助于最大限度地减少抑制剂的浓度,也可以增加 DNA 聚合酶和引物的用量。在某些情况下,如果无法获得 DNA,可能还需要增加一个预处理步骤。

这些术语指的是进行 PCR 检测时需要考虑的参数。
产量:在 PCR 反应中产生的 DNA 量。高产率可提高灵敏度。
保真度:酶将正确的 dNTP 加到延伸的 DNA 链上的准确性。对于标准 PCR 而言,这一点并不重要,但对于测序或表达而言,可能需要高保真混合液(如高特异性 Pfu HS 混合液 (MDX006))。
处理能力:聚合酶与模板结合的时间长短,因此可扩增片段(扩增片段)的大小。
特异性:用于衡量反应中产生的不需要的副产物。这就是进行热启动 PCR 的原因,它可以防止低温下的错引和非特异性扩增。

Taq DNA 聚合酶已通过多种 PCR 模板的验证,包括从人类、动物和植物样本中提取的 DNA,因此是以下应用的理想选择:
– 终点 PCR 检测
– 高产 PCR 检测
– 快速 PCR 检测
– 多重 PCR 检测
– qPCR 和 RT-qPCR 检测

是的,Taq DNA 聚合酶可用于定量 PCR 扩增 (qPCR),但需要热启动抗体 (MDX014)、qPCR 缓冲液(如快速 qPCR 缓冲液,4x (MDX033))或 RT-qPCR 的一步缓冲液(如 1 步 qPCR 缓冲液,4x (MDX034))和逆转录酶(如 MMLV-RT (MDX044))。

这取决于扩增子的长度和模板的复杂程度。对于快速 PCR,初始变性时间仍为 1 分钟,但对于低复杂度模板(如质粒 DNA),退火时间为 5 秒,延伸时间为 10 秒,对于 1 kb 以下的扩增子就足够了。为了找到最快的最佳条件,对于更复杂或更长的扩增片段,我们建议逐步增加延伸时间,直至 30 秒/kb。

是的,Taq DNA 聚合酶在处理富含 GC 或亚硫酸氢盐转化 DNA 等困难样本时效果非常好。不过,PCR 的热启动(如 MDX014)很重要,因为它能减少引物二聚体和非特异性扩增。
如果需要优化,我们建议从退火温度和亚硫酸氢盐转换开始,因为该过程会使 DNA 断裂,所以增加模板和聚合酶的用量可能会有帮助。

该酶的错误率约为每 2.0 x 10⁵ 个核苷酸合成 1 个错误。如果您正在寻找一种错误率较低的 DNA 聚合酶,则应使用高保真 DNA 聚合酶(如 High-Fidelity Pfu (MDX003))或混合物(如 High-Specificity Pfu HS Mix (MDX006))进行下一代测序 (NGS) 文库或表达。

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