提取对照与测试样品经过相同的处理。
提取对照包括用于 qPCR 检测的内参序列（大肠杆菌细胞或人工胶束）和对照混合物（包含特定引物和探针（发射波长 = 560nm 或 670nm））。将细胞添加到样品或裂解缓冲液中，并与样品一起裂解和提取，以进行下游扩增。提取对照的检测可作为 PCR 阳性对照，确认提取和扩增步骤是否成功，避免对 PCR 假阴性结果的误解。
人工萃取对照在萃取过程评估中的优势在于可以验证样品萃取过程。提取对照组产生的信号可确认提取步骤的成功，并监测可能导致偏差或 PCR 假阴性结果的 PCR 抑制剂的共同纯化。对照组中的看门基因或尖峰基因不能监测整个提取过程，特别是裂解步骤，对于看门基因，还不能监测提取效率、降解样品以及看门基因表达水平变化的可能性。
提取对照的引物和探针在对照混合液中。
这两种颜色是提取控制探针上的荧光染料。红色混合对照（Cy5 – 发射波长 = 670 纳米）和橙色混合对照（HEX – 发射波长 = 560 纳米）。这样，您就可以在多重检测中选择一种适合现有方案的荧光染料。
不会，提取对照组可与市售硅胶膜提取试剂盒和 CHELEX 基质配合使用，并已在多种 qPCR 平台上进行了测试。
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