RNase 抑制剂

核糖核酸酶(RNase)无处不在,可以通过多种方式进入实验:例如,在 RNA 分离过程中的共纯化、赤手和移液器吸头的携带。这种 RNase 污染往往不被注意。RNase 抑制剂是 RT-qPCR 等对 RNA 敏感的应用的理想选择,因为即使是少量的 RNase 也会对最终的实验结果造成损害。

Meridian 的 RNase 抑制剂

RNase 抑制剂对逆转录酶的影响

Meridian RNase 抑制剂是多种真核生物 RNase 的高效抑制剂,不会抑制聚合酶或逆转录酶的活性,因此可用于 cDNA 合成、一步 PCR 或定量 PCR 反应。

在有 RNase 抑制剂(1 – 5 号泳道)和无 RNase 抑制剂(7 – 11 号泳道)的情况下,对 2 倍序列稀释的 HeLa 细胞总 RNA(1 μg – 0.075 μg)进行反转录,然后在标准 PCR 条件下扩增血管紧张素 II 受体基因的 1 kb 片段。在 RNase 抑制剂存在或不存在的情况下,PCR 产物没有可检测到的差异,这表明在 cDNA 合成过程中添加 RNase 抑制剂不会干扰逆转录酶的功能。

RNase抑制剂,MDX056

有 250 µL(10,000 单位)或 2.5 mL(100,000 单位)等分装可供选择

索取样品

RNase抑制剂(不含甘油),MDX120

提供 100 µL(4,000 单位)或 500 µL(20,000 单位)等分装

索取样品

说明

Meridian RNase 抑制剂来自一种重组蛋白,它能以 1:1 的非共价比例抑制不同的 RNase(A、B、C)。它们的结合常数为 1014 M,适用于任何可能存在 RNase 问题的应用。RNase Inhibitor 经过活性、SDS-PAGE 纯度以及不含内切酶、缺口酶和外切酶的测试。无甘油配方确保了 RNase Inhibitor(无甘油)与冻干格式的兼容性。

规格

说明一种重组核糖核酸酶抑制蛋白,可抑制不同的核糖核酸酶(A、B、C)。
来源携带 RNase 抑制剂基因的大肠杆菌菌株
分子量50 kDa
浓度40 U/µL
协会常数1014M
参数25 – 55 °C 最佳反应温度
pH 值范围5.0 – 8.0
外观无色透明溶液
应用RNA 纯化、cDNA 合成。RT-PCR、RT-qPCR、体外转录/翻译、RNA 测序、RNase 保护检测、酶法 RNA 标记反应
样品类型核糖核酸
演示文稿小药瓶
存储温度-20 °C (MDX120 为 -80 °C)
混合稳定性见外标签
抑制剂用 RNase 抑制剂和浓度梯度 RNase A 培养总 RNA,琼脂糖凝胶上未观察到降解现象
DNA 污染大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特异性目标的 PCR 扩增中未检测到与阴性对照重叠的痕迹。
DNase/RNase 污染未检测到降解

 

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常见问题

为什么需要 RNase 抑制剂?

在对 RNA 进行酶处理时,通常会使用 RNase 抑制剂作为预防措施,以抑制和控制此类污染物。少量核糖核酸酶可与分离出的 RNA 共同纯化,或从环境中引入,影响下游应用。

是的,为了安全起见,我们强烈建议在所有 RT 反应中使用 RNase 抑制剂,因为 RNase 几乎无处不在,而且在 RNA 制备和反应设置过程中很容易污染样品。即使是微量的 RNase 也会对 RNA 造成缺口,导致 cDNA 产物缩短、产量降低和 RT-PCR 灵敏度下降。

不会,RNase 抑制剂是一种蛋白质,在较高温度下会变性。

是的,大多数 RNase 抑制剂需要还原条件才能正常工作,如果缓冲液不含 DTT,RNase 抑制剂将不起作用。要达到最佳的 RNase 抑制效果,需要 1 mM DTT 的最终浓度。

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