dATP,100mM,锂盐

即用型测序级超纯脱氧腺苷三磷酸酯(dATP),100 mM 溶液,在 pH 值为 7.5 的纯净水中以锂盐形式供应,由优质原料在我们的专用设施中使用高度特定的生产系统酶法合成。生产过程剔除了其他市售 dNTP 产品中常见的杂质和 PCR 特异性抑制剂,如修饰核苷酸、四磷酸盐和焦磷酸盐(>99% 纯度由定量 HPLC 测定)。锂盐比钠盐更耐受反复冷冻和解冻循环,由于锂对各种微生物具有抑菌作用,因此锂盐 dNTP 制剂在整个保质期内都能保持无菌状态。

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Meridian 的 dATP,100mM,锂盐

高灵敏度多重 qPCR 反应

使用 dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP 在锂盐中进行单重反应(蓝线)和四重反应(红线),用四种不同探针扩增 10 倍序列稀释的人类基因组 DNA。结果表明,单重反应和多重反应都具有相同的高灵敏度、出色的重现性和 Ct 值,而且多重反应的效率通常不会降低。

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Application: Specimen Type: Concentration: High Concentration: NoWet: No
Glycerol-Free: NoLyo-Ready: Air-Dryable: Dryable: Sustainability:

说明

dATP,100mM,锂盐可达到很高的 dNTP 质量,批次间的差异极小。它们按照最高标准生产,完全适用于最苛刻的应用,如高灵敏度 qPCR。

规格

说明超纯 dATP(2′-脱氧腺苷-5′-三磷酸)锂盐溶液是在我们的专用设施中,利用高度特定的生产系统,采用优质原料酶法合成的。
组成C10H12N5O12P3Li4
分子量514.916 克/摩尔
浓度(λmax 时,pH 7.0,ԑ = 15.4 E x mmol-1 x cm-1)100 毫摩尔 ± 5%
外观无色透明溶液
应用cDNA 合成、PCR、长程 PCR(>20 kb)、高保真 PCR、RT-PCR、qPCR、RT-qPCR、LAMP、芯片、长程 NGS
演示文稿1 瓶
溶液 pH 值(20°C 时)7.5 – 8.0
λmax (pH 值为 7.0 时)259 ± 1 纳米
A250/A2600.78 ± 0.03
A280/A2600.15 ± 0.02
一致性用 PCR 扩增 3 kb 的扩增片段,并用 dATP 稀释。
DNA 污染在大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特异靶标的 qPCR 扩增中未检测到与阴性对照重叠的痕迹。
DNase/RNase/Nickase 活性未检测到
dATP 纯度(λmax 时的 HPLC 面积百分比)≥99%
dNDP + dNMP(λmax 时的 HPLC 面积百分比)<1%
DNase/RNase 污染未检测到降解

目录和手册

分子诊断试剂解决方案
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常见问题:dATP,100mM,锂盐

为什么 dATP 的纯度很重要?

dATPs 或三磷酸腺苷是 DNA 的 “建筑材料”。所有 dNTPs 的纯度和稳定性是成功完成 PCR 的两个基本要素。在长程 PCR、RT-PCR、多重 PCR 和实时应用等敏感技术中,特别推荐使用高度纯化的 dNTPs 制备 PCR。当起始模板量极少时,dNTPs 的纯度也很重要。

PCR 反应中 dATP 的标准浓度为 0.2 mM。如果加入等体积的 100 mM dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP,最终的储备液中每种 dNTP 的浓度为 25 mM,相当于 100 倍的工作浓度,因此需要在 20 µL 标准 PCR 反应中加入 0.2 µL。

这要看情况。您或许可以提高 DNA 产率,但必须优化整个 PCR 反应,调整缓冲液和 Mg2+ 等。这不仅仅是核苷酸的问题。

是的。钠盐 dNTP 产品是标准级产品,因此我们推荐将这些 dNTP 用于 PCR。对于更复杂的反应,如长模板扩增、实时 PCR 和 NGS,我们推荐使用锂盐 dNTP 产品。

是的。储存核苷酸的最佳 pH 值为 7.0-8.2(20°C 时的 pH 值)。酸性 pH 会导致 dATPs(脱氧腺苷三磷酸酯)水解为 dADPs(脱氧腺苷二磷酸盐)和 dAMPs(脱氧腺苷单磷酸盐),使其不太适合 PCR 应用。在冷冻/解冻循环过程中,dATP 溶液的 pH 值可能与 20°C 时的 pH 值不同。钠盐对温度敏感,因此在反复冷冻和解冻时需要小心,最好将钠盐 dATP 分装成较小体积并冷冻保存,以延长其保质期。

dNTPs 的酶法合成采用高度特异性的酶系统,可去除杂质和 PCR 抑制剂,如修饰的核苷酸、PPi 和脱氧核苷酸四磷酸盐。化学生产过程中产生的杂质(如微量 dNDPs、焦磷酸盐或其他离子种类(如醋酸盐))会阻碍 PCR 反应。这些污染物可能导致产量低或根本没有 PCR 产物。除非彻底纯化,否则化学合成的 dNTPs 通常含有脱氧核苷酸四磷酸盐,而这种物质是强大的 PCR 抑制剂。化学合成还会导致脱氨基和其他核苷酸修饰,而酶法合成的 dNTPs 则可避免这些风险。

我们建议您使用分子生物学或 PCR 级水稀释 dATP。

是的,我们所有的 dNTP 都不含甘油,因此可以冻干。

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