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说明
dUTP，100mM，锂盐的质量最高，批次间差异最小。它是按照最高纯度标准制造的，完全适用于最苛刻的应用，如长 PCR 或高灵敏度 qPCR。
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常见问题：dUTP 混合液
为什么 dNTP 的纯度很重要？
dNTPs 或脱氧核苷酸三磷酸酯是 DNA 的 “建筑材料”。dNTP 的纯度和稳定性是成功完成 PCR 的两个基本要素。在长程 PCR、RT-PCR、多重 PCR、诱变实验和实时应用等敏感技术中，特别推荐使用高纯度的 dNTP 制剂。当起始模板量极少时，dNTP 的纯度也很重要。
PCR 中应使用多大浓度的 dNTPs？
PCR 反应中每种 dNTP 的标准浓度为 0.2 mM。如果起始储备液是每种 dNTP 的 100 mM 溶液，则需要在 50 µL 标准 PCR 反应中加入每种核苷酸 0.1 µL。由于这样做不方便，建议准备混合液：如果以等摩尔量混合 100 mM dNTP 储存液，混合液的总浓度为 100 mM，或每种核苷酸的浓度为 25 mM。从 100 倍的储备液中，您需要向 50 µL 的反应中加入 0.5 µL。Meridian 还提供总浓度为 40 毫摩尔（每种 10 毫摩尔）的更稀释的混合液，这是 50 倍的储备液，以及总浓度为 10 毫摩尔（每种 2.5 毫摩尔）的 10 倍工作储备液。
能否通过添加更高浓度的 dNTPs 来提高 PCR 的 DNA 产率？
这要看情况。您或许可以提高 DNA 产率，但必须优化整个 PCR 反应，调整缓冲液和Mg2+等。这不仅仅是核苷酸的问题。
dNTP 质量会影响加工效率吗？
dNTPs 的质量对于复杂的反应（如长模板扩增和实时 PCR）尤为重要。甲基化和脱氨基的核苷酸在使用校对 DNA 聚合酶时效果较差。
dNTP 溶液的 pH 值对稳定性重要吗？
是的。储存核苷酸的最佳 pH 值为 7.5-8.2（20°C 时的 pH 值）。酸性 pH 会导致 dNTPs 水解为 dNDPs 和 dNMPs，使其不太适合 PCR 应用。在冷冻/解冻循环过程中，dNTP 溶液的 pH 值可能与 20°C 时的 pH 值不同。锂盐溶液的 pH 值不像钠盐那样受温度影响，因此在使用锂盐的情况下，当 dNTP 反复冻融时，pH 值不会发生剧烈变化。这使得 dNTP 制剂更加稳定，因此保存期比钠盐长很多。
酶法合成 dNTP 比化学合成 dNTP 有哪些优势？
dNTPs 的酶法合成采用高度特异性的酶系统，可去除杂质和 PCR 抑制剂，如修饰的核苷酸、PPi 和脱氧核苷酸四磷酸盐。化学生产过程中产生的杂质（如微量 dNDPs、焦磷酸盐或其他离子种类（如醋酸盐））会阻碍 PCR 反应。这些污染物可能导致产量低或根本没有 PCR 产物。除非彻底纯化，否则化学合成的 dNTPs 通常含有脱氧核苷酸四磷酸盐，而这种物质是强大的 PCR 抑制剂。化学合成还会导致脱氨基和其他核苷酸修饰，而酶法合成的 dNTPs 则可避免这些风险。
与钠盐相比，以锂盐形式呈现的 dNTPs 有哪些优势？
前面提到 dNTPs 在锂盐中的溶解度比在钠盐中大。此外，锂盐中的 dNTPs 比钠盐中的 dNTPs 更耐受反复冷冻和解冻。此外，它们在整个储存期间都能保持无菌状态（锂离子已被证明对各种微生物有显著的抑菌作用）。最后，使用锂盐核苷酸制剂可减少盐引起的伪影，提高测序凝胶的可读性。锂盐非常适合 PCR 测序和标记应用。
dNTP 混合液的浓度是各浓度还是总浓度？
我们所有 dNTP 混合液的浓度都是累加的，例如 100 mM dNTP 混合液由 25 mM 的 dNTP（dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP）组成。
我希望使用 dUTP 和 UDGase 防止 PCR 产物受到携带污染，这该如何操作？
当使用 dUTP 替代 dTTP 或与 dTTP 结合使用时，PCR 产物将成为尿嘧啶 DNA 糖基化酶 (UDGase) 的合适底物，从而使用户能够在开始当前扩增之前彻底销毁之前 PCR 反应中的任何污染 DNA。Meridian 提供的 dUTP 既可以作为独立产品，也可以作为 dUTP 混合液的一部分。
我需要将 dNTPs 稀释到不同的浓度，应该用什么作为稀释剂？
我们建议您使用分子生物学或 PCR 级水稀释 dNTPs。
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