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无甘油 DNA Pol I Klenow 片段 exo- (HC)

Glycerol-Free DNA Pol I Klenow Fragment exo- (HC) 是大肠杆菌DNA 聚合酶 I 的高浓度 N 端截断物,它保留了聚合酶活性,但失去了 5′-3′ 外切酶活性,并且发生了突变(D355A、E357A),从而失去了 3′-5′ 外切酶活性。它专为下一代测序文库制备中的 dA 和 dT 尾接适配器连接而设计。

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Meridian 不含甘油的 DNA Pol I Klenow 片段 exo- (HC)

说明

Glycerol-Free DNA Pol I Klenow Fragment exo- (HC) 是一种不含甘油的高浓度酶(50 U/L),主要用于下一代测序(NGS)文库制备,可单独使用或作为末端修补混合物的一部分,通过去除 3′ 悬空和填充 5′ 悬空使双链 DNA 变钝,以便随后用 T4 DNA 连接酶连接适配体。该酶具有适度的链置换活性,还可用于使用随机引物生成探针、双脱氧测序和随机引物标记。

不含甘油的 DNA Pol I Klenow 片段 exo- (HC) 采用不含甘油的储存缓冲液,随附 Lyo-Ready Klenow 反应缓冲液 (5x),经过优化,可在不含甘油的情况下提供优异、稳定的性能,使您能够提供可靠的结果,并增加冻干能力。这样,您就可以在环境温度下放心地储存混合物,或进行依赖于小型化反应元件的诊断测定,如护理点 NGS。

目录和手册

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目录
不含甘油的 T4 DNA 连接酶(HC)
无甘油 T4 DNA 连接酶(HC)
高特异性 Pfu HS 混合物
高特异性 Pfu HS 混合物

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常见问题:不含甘油的 DNA Pol I Klenow 片段 exo- (HC)

DNA Pol I Klenow 片段和 DNA Pol I Klenow 片段 exo- 有什么区别?

正如大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 的 5′ – 3′ 外切酶活性可能不理想一样,Klenow 片段的 3′ – 5′ 外切酶活性在某些应用中也可能不理想。这个问题可以通过在编码 Klenow 的基因中引入突变来解决。这样就能表达出保留 5′ – 3′ 聚合酶活性但缺乏任何外切酶活性(5′ – 3′ 或 3′ – 5’)的酶。

不,DNA Pol I Klenow 片段外显子不能填充 3′ 悬垂。要形成钝末端,必须去除 3′ 悬垂。无甘油 DNA Pol I Klenow 片段 (HC) (MDX208) 和 T4 DNA 聚合酶 (MDX207) 是去除 3′ 悬空的最佳选择。

是的,DNA Pol I Klenow 片段外切酶是这种应用的理想选择,它通过填充 5’悬垂来实现这一目的,而且由于缺乏 3’→5′ 外切酶活性,标记的核苷酸在被聚合酶整合后不会被移除。

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