Meridian 的无甘油高保真 Pfu（HC）
- 高浓度 Pfu 聚合酶，可批量生产 PCR 混合母液
- 误差率为 3.0 x 10-6
- NGS 文库扩增的理想选择
- 不含甘油，用于制备干化 PCR 检测试剂
多重扩增
不含甘油的高保真 Pfu（HC）用 5 倍量的 Lyo-Ready Pfu 反应缓冲液冻干，并在 37°C 下保存 7 天和 28 天。冻干样品在 7 个目标（793 bp、649 bp、548 bp、418 bp、332 bp、196 bp、135 bp）的多重 PCR 扩增中针对未冻干的相同酶和反应缓冲液（湿参考）进行了测试，以证明冻干后的稳定性，允许延长储存时间并用于 NGS 文库扩增。
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说明
高保真 Pfu 是一种可恒温的高保真 DNA 聚合酶，从怒火热球菌（Pyrococcus furiosus）中分离出来。Pfu 聚合酶在镁存在的情况下按 5´→3´ 方向复制 DNA，但也具有 3´→5´ 外切酶（校对）活性。在聚合过程中可能出现的碱基错接会被这种校对活性迅速切除。高保真蛋白的错误率为 3.0 x 10-6，可产生长度达 5 kb 的钝头扩增子。Glycerol-Free High-Fidelity Pfu (HC) 采用不含甘油的缓冲液储存，并配有 5x 反应缓冲液，其中含有镁、dNTPs 和冻干所需的赋形剂。
规格
| 说明 | 高浓度、高保真 Taq DNA 聚合酶，配有单独的 Pfu 聚合酶稀释缓冲液和 10 倍 Pfu 反应缓冲液。 |
| 浓度 | 20 U/µL |
| 外观 | 无色透明溶液 |
| 应用 | PCR、NGS 文库制备、克隆、蛋白质表达 |
| 样品类型 | cDNA, DNA |
| 演示文稿 | 3 瓶 |
| 存储 | -20 °C |
| 混合稳定性 | 见外标签 |
| 一致性 | 测试样本和参照样本之间的 ± 0.5 Ct 差异 |
| DNA 污染 | 在大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特异性目标的 PCR 扩增中未检测到与阴性对照重叠的痕迹。 |
| DNase 污染 | 检测不到降解 |
目录和手册
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常见问题：高保真 Pfu
什么是校对聚合酶？
在自然界中，DNA 聚合酶纠正正在延伸的 DNA 链中核苷酸错位的能力往往对宿主生物的生存至关重要。这种能力被称为 “校对活动”，发生在 3′到 5′方向。这种活动也会导致聚合酶去除 3’end 处悬空的未配对核苷酸（A-overhangs），形成钝末端。
我的 DNA 样品含有 PCR 抑制剂，高保真 Pfu 还能使用吗？
如果可能的话，我们建议对受影响的样本进行额外的清理，或者建议使用高特异性 Pfu HS 混合液（MDX006），因为它可以在存在抑制剂的情况下工作。
高保真 Pfu 聚合酶能扩增多长的片段？
经过验证，高保真 Pfu 可用于 5 kb 以下的模板。
什么是 DNA 靶标富集？
DNA 目标富集是测序前的 DNA 准备步骤，在这一步骤中，DNA 序列会被直接扩增（基于多重 PCR）或捕获（基于混合捕获）。这些富集的 DNA 片段随后可使用 DNA 测序仪进行测序。
冻干 PCR 检测试剂在干燥后能稳定使用多长时间？
冻干 PCR 分子检测试剂盒如能正确密封保存，可在环境温度下保持稳定长达 2 年。
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