高特异性 Pfu HS 混合液结合了缓冲液化学、PCR 增强剂和稳定剂方面的最新进展，以及由适配体介导的热启动聚合酶、dNTPs 和MgCl2。先进的缓冲液化学成分专为快速、高重现性的多重 PCR 而开发，具有卓越的灵敏度和特异性，使高特异性 Pfu HS Mix 成为 DNA 目标富集和 NGS 文库扩增的完美选择。
在自然界中，DNA 聚合酶纠正正在延伸的 DNA 链中核苷酸错位的能力往往对宿主生物的生存至关重要。这种能力被称为 “校对活动”，发生在 3′到 5′方向。这种活动也会导致聚合酶去除 3’end 处悬空的未配对核苷酸（A-overhangs），形成钝末端。
高特异性 Pfu HS 混合保真度是使用 Lee 等人开发的方法（Mapping DNA polymerase errors by single-molec sequencing.Lee F. D., et al. Nucleic Acids Research, 44 (13) e118 2016 (doi: 10.1093/nar/gkw436)) 使用条形码策略和 NGS 来描述 DNA 聚合酶的平均错误率、错误热点和病变旁路保真度。
高特异性 Pfu HS 混合液可在存在抑制剂的情况下工作。如果存在过多干扰，可以增加镁的浓度，例如，在全血含量超过 10%的情况下，镁的浓度应增加到 4 mM（在最终反应中）。
经验证，高特异性 Pfu HS 混合液可用于 5 kb 以下的模板。
DNA 目标富集是测序前的 DNA 准备步骤，在这一步骤中，DNA 序列会被直接扩增（基于多重 PCR）或捕获（基于混合捕获）。这些富集的 DNA 片段随后可使用 DNA 测序仪进行测序。
适配体是经过设计的寡核苷酸，可与高保真 DNA 聚合酶的活性位点结合，但在 PCR 扩增循环过程中，随着温度升高，适配体会变性并释放出来。不过，这种由适配体介导的抑制/激活过程是完全可逆的，因此在热循环结束后，当反应温度降低时，适配体会重新折叠并重新与高保真 DNA 聚合酶结合，从而抑制样本中的任何进一步活性。事实证明，这在工作流程中非常重要，因为反应结束后不希望出现的聚合酶活性会干扰基线读数，例如扩增文库后的 NGS。
不，aptamer 的两端被阻断，以防止它们成为序列。
高特异性 Pfu HS 混合液应储存在 -20°C 下，以保持最佳活性。我们不建议将高特异性 Pfu HS 混合液保存在 -80°C 的温度下，因为活性位点上可能会形成冰晶，从而影响或破坏酶的活性。
规格
说明：高保真 PCR 主混合物，含有可逆的温度依赖性热启动 Taq DNA 聚合酶和缓冲液高保真 PCR 母液，含有可逆的、温度依赖型热启动 Taq DNA 聚合酶和缓冲液
浓度：2 x
外观：无色透明溶液
热启动。Aptamer mediated
应用：PCR、NGS 目标富集、NGS 文库制备
样品类型：cDNA、DNA
规格：1 瓶
储存：-20 °C
混合液稳定性：参见外部标签
一致性：测试样本与参考样本之间的差异为 ± 0.5 Ct
DNA 污染：
DNase 污染：未检测到降解
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