Meridian 的耐抑制剂 qPCR/RT-qPCR 母液混合物
- 即用型 qPCR 混合母液专为粗样品扩增而设计，无需复杂或耗时的提取过程
- 4 倍浓度的混合母液可增加样品量；只需添加引物、探针和临床样品即可
- 是在样本有限的情况下开发定量 PCR 检测的理想之选
耐抑制剂 qPCR 混合反应效率
对含有各种已知 PCR 抑制剂（从全血到生物液体（反应中占 20%））的反应进行了反应效率测定。结果表明，在多种常见 PCR 抑制剂存在的情况下，耐抑制剂 qPCR 缓冲液（用于 MDX013）的反应效率仍保持在 90-110% 的范围内。
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说明
Meridian 的通用型耐抑制剂 qPCR/RT-qPCR 配方是即用型定量 PCR 超级混合物，包含除引物、探针和模板之外的所有成分，可用于直接 qPCR 和 RT-qPCR。它们设计用于开发 qPCR 多重检测，只需最少的样品处理和快速的周转时间 (TAT)。由于混合物对各种 qPCR 抑制剂具有很强的抗性，因此可用于粗裂解液或抑制剂丰富的样本，直接检测各种生物样本中的病原体（包括病毒和细菌），并分析细胞中的基因表达。
Inhibitor-Tolerant qPCR Mix 可作为标准的 2 倍或 5 倍定量 PCR 主混合物使用；这种灵活性为检测开发人员提供了更多的样本空间，提高了低拷贝数样本的灵敏度。从预处理（如需要）到 qPCR 的所有步骤都可在一个试管中完成，大大减少了操作时间和污染风险。
Inhibitor-Tolerant RT-qPCR Mix 是一种 4x 定量 PCR 混合母液，可添加或不添加低浓度的 ROX（被动参比染料），再次为检测开发人员提供了更多的样品空间，提高了低拷贝数样品的灵敏度。Inhibitor-Tolerant RT-qPCR Mix 专为在快速热循环条件下进行高重复性、高准确性的 RNA 和 DNA 目标扩增而设计，即使在血液、尿液和粪便中存在难以检测的 qPCR 抑制剂的情况下，也能在 qPCR 多重检测中提供出色的结果。
规格
| 说明 | 结合了缓冲液化学、PCR 增强剂和稳定剂的最新进展，以及优质酶、dNTPs 和MgCl2。专为 PCR 反应而设计，可在人体和动物血液等抑制剂存在的情况下，获得重复性高、准确度高的检测结果。 |
| 浓度 | 2x、4x 和 5 x |
| 外观 | 无色透明溶液 |
| 热启动 | 抗体介导 |
| 应用 | 基于探针的实时 PCR、两步式 RT-qPCR、一步式 RT-qPCR |
| 样品类型 | cDNA、粗制或纯化 RNA 和/或 DNA |
| 演示文稿 | 1 瓶 |
| 存储 | -20 °C |
| 混合稳定性 | 见外标签 |
| 一致性 | 测试样本和参照样本之间的 ±0.5/1 Ct 差异 |
| DNA 污染 | 在大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特异性目标的 PCR 扩增中未检测到与阴性对照重叠的痕迹。 |
| DNase/RNase 污染 | 未检测到降解 |
目录和手册
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常见问题：耐抑制剂混合物
耐抑制剂 qPCR 混合液可用于哪些样品类型？
我们已经测试了人和牛的全血、唾液、痰液、尿液、脑脊液 (CSF)、牛奶、粪便样本和植物裂解液；其他类型的样本也可以使用，但我们建议测试不同的浓度，以确定可以耐受的浓度。我们还建议您试用我们为血液、唾液/痰液、尿液、粪便或植物等每种样本类型专门设计的样本专用 qPCR/RT-qPCR 母液。
我需要在反应中添加镁吗？
耐抑制剂 RT-qPCR 混合液对镁、dNTPs、稳定剂和增强剂进行了优化，可在快速热循环条件下实现高重复性、高准确性的 RNA 和 DNA 目标扩增，即使在有难处理的 PCR 抑制剂存在的情况下，也能在 qPCR 多重检测中提供出色的结果。因此，我们不建议添加任何其他材料，只建议添加引物、探针和样品。
qPCR 多重检测的推荐反应条件是什么？
在进行复用时，可使用标准条件，但如有必要，可将反转录反应时间延长至 20 分钟，和/或将温度升高至 55 摄氏度，退火/延长时间可延长至 60 秒，和/或将温度升高至 65 摄氏度，但这需要在优化过程中进行测试。
您是否使用突变聚合酶来克服抑制剂？
我们使用自己专有的 Taq 聚合酶和高度优化的缓冲系统来克服抑制作用。
这些混合料可以烘干后在室温下储存吗？
这些混合物含有甘油，因此无法干燥；请参阅我们针对特定样本的冻干或风干耐抑制剂定量 PCR 混合物系列。
如何优化粗样品或粗提取物？
我们建议使用一定范围的粗样品浓度或提取量，以确定在什么时候开始出现不可接受的 PCR 抑制。由于血液和粪便标本等某些样本类型通常含有更多的 qPCR/RT-qPCR 反应抑制剂，因此情况会有所不同。
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