说明 | 高度纯化的 Taq DNA 聚合酶。它具有低 DNA 背景和严格的热启动特性,是低拷贝细菌目标 PCR 的理想选择,可避免水质检测等方面的假阳性扩增。 |
浓度 | 5 U/µL |
外观 | 无色透明溶液 |
热启动 | 化学 |
纯度 | >90% |
应用 | PCR、两步 RT-PCR |
演示文稿 | 1 瓶 |
存储 | -20 °C |
混合稳定性 | 见外标签 |
一致性 | 测试样本和参照样本之间的 ±0.5 Ct 差异 |
DNA 污染 | 在大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特异性目标的 PCR 扩增中未检测到与阴性对照重叠的痕迹。 |
DNase 污染 | 检测不到降解 |
使用化学热启动 Taq 聚合酶时,聚合酶与化学基团共价连接,以阻止酶在室温下的活性。
优点
– 比抗体热启动方法更严格,因此即使在室温下长时间也不会有活性,最大限度地减少了非特异性扩增
– 生物负荷低,因为它不含动物和细菌源成分
考虑因素
– 聚合酶完全活跃所需的激活时间较长
5 U/µL 低 DNA Taq HS 缺乏 3′ – 5′ 外切酶活性。不过,该酶具有 5′ – 3′ 核酸酶活性。在 PCR 扩增的延伸步骤中,该酶将从 5′ 端开始水解任何阻塞链。
5 U/µL 的低 DNA Taq HS 缺乏校对活性,因此会留下可用于 TA 克隆的 3′- 悬空。为了使反应进入额外 A 状态,72°C 的最后延伸时间应延长至 15-30 分钟。
是的,一旦激活,Low DNA Taq HS, 5 U/µL 将保持活性。降低温度不会使 Low DNA Taq HS, 5 U/µL 失活。
10 分钟激活后,酶将在随后的循环中保持完全功能。
多重 PCR 是指在一次 PCR 中共同扩增多个扩增子。由于在单个反应中加入了多组引物,因此可能会形成引物二聚体或引物错引,从而失去特异性,降低特异性产物的产量。由于 5 U/µL 的 Low DNA Taq HS 在热启动 PCR 之前没有活性,因此多组引物不可能与自身发生反应,从而大大提高了特异性产物的产量。
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