Lyo-Compatible MMLV-RT

Lyo-Compatible MMLV-RT 是一种高浓度反转录酶和稀释缓冲液。将 Lyo-Compatible MMLV-RT 添加到不含甘油的 qPCR 混合液中,可制成 Lyo-ready 1 步 RT-qPCR 混合液,以便随后冻干。

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Meridian 的 Lyo 兼容型 MMLV-RT

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Application: Specimen Type: Concentration: High Concentration: NoWet: No
Glycerol-Free: NoLyo-Ready: Air-Dryable: Dryable: Sustainability:
特定批次酶浓度列表

逆转录酶活性:
356.0 U/µL 批量编号:EM032-B069810 , EM033-B075830, EM032-B079280, EN055-B075840, EM032-B070090, EM033-B078120, EM033-B079610, EN055-B077220, EM032-B078560 , EM033-B078550, EN054-B069830 , EM033-B072620, EM116-B079090, EN055-B071120
逆转录酶活性:
820.6 U/µL 批量编号:EM116-B079670, EM033-B079680, EM032-B079780, EM033-B079960, EN055-B081110, EN055-B081180, EN055-B081460
逆转录酶活性:
676.6 U/µL 批量编号:EN055-B095790, EN055-B102520
逆转录酶活性:
591 U/µL 批量编号:EN055-B099440, EN054-B085190, EN055-B092750, EN054-B088060, EN054-B088340, EN054-B088440, EN055-B092210, EN055-B095500, EN055-B096450, EN055-B097970, EN055-B097120, EN055-B097760
反转录酶活性:
501 U/µL 批量编号:EN055-B103720, EN055-B103930, EN054-B105000, EN055-B107580, EN055-B118430
966.0 U/µL 批量编号:EN055-B127580, EN054-B129970, EN054-B131550

说明

Lyo-Compatible MMLV-RT 是一种高浓度、降低了 RNase H 活性的莫隆尼鼠白血病病毒 (MMLV) 逆转录酶 (RT),在 cDNA 合成方面具有高灵敏度和高效率,适用于湿法或冻干法多重 RT-PCR 检测,可对低拷贝数 RNA 目标进行高灵敏度检测。

规格

说明高浓度反转录酶和稀释缓冲液。可用于制作 1 步 RT-qPCR 混合液,以便随后冻干。
浓度> 165 U/µL (参见批次特定酶浓度列表)
外观无色透明溶液
应用cDNA 合成、RT-PCR、PCR、两步式 RT-qPCR、一步式 RT-qPCR
样品类型核糖核酸
演示文稿2 瓶
存储-20 °C
混合稳定性见外标签
DNA 污染大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特异性目标的 PCR 扩增中未检测到与阴性对照重叠的痕迹。
DNase/RNase 污染未检测到降解

目录和手册

分子诊断试剂解决方案
分子诊断试剂溶液
目录
可恒温 MMLV-RT
55C MMLV-RT
目录
高通量分子诊断测定 (MDx) 基本试剂综合指南
加快效率:高通量分子诊断测定(MDx)基本试剂综合指南

常见问题:与 Lyo 兼容的 MMLV-RT

我想使用二级结构非常高的病毒 RNA 进行 cDNA 合成,可以使用与 Lyo 兼容的 MMLV-RT 吗?

对于二级结构非常高的 RNA,我们建议使用 55C MMLV-RT (MDX117),这是一种不含甘油的反转录酶,可在高达 60°C 的温度下使用,可提高困难 RNA 目标的 cDNA 产量,因为这些目标需要更高的温度来变性强二级结构。

避免核糖核酸酶污染是首要问题,因为需要高质量的模板 RNA。您可以添加 RNase 抑制剂 (MDX056)。

Lyo-Compatible MMLV-RT 随附酶稀释缓冲液,但如果要制作 cDNA,还需要含有 0.2 mM dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP、10 mM DTT(二硫苏糖醇)、25 mM KCl、3.5 mM MgCl2 和 50 mM Tris-HCl (7.5) 的缓冲液。但是,如果您想进行 RT-qPCR,我们推荐使用 Lyo-Ready 1-Step RT-qPCR 缓冲液(MDX052)。

可通过添加 EDTA 等螯合剂或加热至 70°C 或更高温度 10 分钟来灭活逆转录酶。

是的,为了启动 cDNA 合成,Lyo-Compatible MMVL-RT 逆转录酶需要引物与其 RNA 模板上的互补序列结合,作为合成新链的起点。对于一般的 cDNA 合成,随机六聚体引物和寡聚(dT)引物既可单独使用,也可混合使用。对于 RT-PCR 和 RT-qPCR,应使用基因特异性引物。

与真核生物复制聚合酶不同,逆转录酶缺乏外切酶活性,因此容易出错。据报道,基于 MMLV 的反转录酶的错误率在 1.1 ×10-4到 4.8 ×10-4 之间。

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