Meridian 的 Lyo-Ready Direct DNA 和 RNA/DNA LAMP 大便混合母液
- 开发肠道致病菌 LAMP 粪便快速检测方法。
- 取消核酸提取步骤，缩短结果产生时间。
- 经验证可用于检测粗样品中的肠道病原体。
- 可湿用或冻干，是开发环境温度稳定的 POC 检测的理想之选。
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说明
腹泻病是全球第八大死因，也是五岁以下儿童的第二大死因。腹泻病由多种细菌、病毒和寄生虫引起，通常通过粪口途径或食源性传播。诊断检测，尤其是护理点（POC）诊断检测，对于快速识别胃肠道感染、提供正确治疗以预防严重并发症和防止传播至关重要。理想情况下，POC 诊断方法使用简单，只需对样本进行最低限度的预处理，无需冷藏室储存，其灵敏度和特异性不亚于实验室检测。使用粪便作为样本进行检测会给 POC 检测带来巨大挑战，因为粪便样本可能很复杂，含有食物残渣、脱落的上皮细胞和粘液，以及潜在的 PCR 抑制剂，如胆盐、多糖、血红蛋白和分解代谢物质。通常情况下，复杂样本需要进行预处理，以便在检测前提取 DNA 或 RNA。
Lyo-Ready Direct DNA LAMP Stool 和 Lyo-Ready RNA/DNA LAMP Stool 混合液将更高的耐受性与快速、稳健的等温扩增结合在一起，可使用粗加工的粪便样本进行高灵敏度的直接检测。这种混合物设计独特，可以克服更高浓度的抑制剂，因此不需要 DNA 或 RNA 纯化步骤来纯化病人样本。反应动力学速度极快，因此能更快地得出结果，并具有卓越的扩增灵敏度和特异性。此外，4 倍浓缩的混合母液采用溶菌淀粉配制，优化了冷冻干燥过程，可进行环境温度稳定的检测，是 POC 粪便检测的理想选择。
目录和手册
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常见问题：LAMP 大便测试
等温扩增与 qPCR 有何不同？
环路介导等温扩增与 qPCR 的主要区别在于，在环路介导等温扩增中，扩增是在单一恒定温度下实现的，而在 qPCR 中，扩增需要在热循环仪上的多个温度之间循环。环路介导等温扩增使用的聚合酶具有很高的链置换活性，如 Bst DNA 聚合酶，而不是在高温下融化 DNA 链。由于这些聚合酶不需要多个温度，它们可以在不到一个小时的时间内扩增一个目标，在某些情况下甚至只需 10 分钟。
在 LAMP 粪便检测中，您最多可以使用多少粪便。
我们在混合液中使用了高达 20 毫克/毫升的人类粪便，这些粪便经过均质化，并通过离心分离进行澄清，可能需要进行一些预处理。
您推荐哪种载体缓冲器？
市场上有多种缓冲液可用于粪便检测，包括磷酸盐缓冲盐水（PBS）、Cary-Blair 培养基、粪便转运和恢复（STAR）缓冲液以及 DNA/RNA Shield。
冻干后的混合物能稳定使用多长时间？
如果正确存放在密封袋中，它在环境温度下的稳定性可达 2 年。
粪便 DNA 是否总是存在？
是的，其中大部分来自细菌和病毒，但也有一些人体细胞在死亡和被替换后脱落到管腔中，这些细胞经过凋亡，释放出 DNA。肿瘤细胞可能存在，但通常不到整个粪便样本中人类 DNA 片段总数的 1%。
是否需要预处理？
预处理取决于你正在研究的细菌，你可能需要加热到 95°C 5 分钟，对于某些细菌，可能需要蛋白酶 K 步骤（蛋白酶 K 55°C 15 分钟，然后在 98°C 5 分钟）或使用非离子去垢剂（如吐温-20，最终浓度为 0.2%，然后在室温下孵育 10 分钟）。
使用 DNA 专用粪便混合物与 DNA/RNA 粪便混合物时，DNA 的性能有何不同？
我们认为这两种混合物在性能上没有区别，因此我们将 Lyo-Ready Direct RT-LAMP Stool 混合物称为 Lyo-Ready Direct RNA/DNA LAMP Stool 混合物，因为它可以同时用于两种用途。
冻干混合物和液体混合物的反应条件是否相同？
是的，Lyo-Ready Direct DNA LAMP Stool 和 Lyo-Ready Direct RNA/DNA LAMP Stool 可以作为液体混合物使用，也可以冻干后储存长达 24 个月，无需改变反应条件，而且冻干/常温储存不会影响检测灵敏度。
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