Meridian 的 Lyo-Ready qPCR 缓冲液,2.5x
- 用于创建超灵敏 qPCR 检测
- 采用专门的混合冻干敷料配制而成,可冻干成珠状或饼状
- 最大限度地减少非特异性扩增,提高检测灵敏度和可靠性
- 效率高,在多重 qPCR 检测中表现出色
强大的复用能力

在四重 qPCR 探针检测中,使用 Lyo-Ready qPCR 混合液从合成 DNA 模板扩增巨细胞病毒 (CMV) 腺病毒、爱泼斯坦-巴尔病毒 (EBV) 和 DNA 提取对照这三种病毒序列的效率相同。结果表明,这三种病毒的扩增效率和灵敏度都很高,证明了 Lyo-Ready qPCR 混合液能从单一样本中同时检测低拷贝数 DNA 目标。
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说明
Lyo-Ready qPCR 缓冲液 2.5x 是一种不含甘油的 qPCR 反应缓冲液,含有冻干萃取物,设计用于在快速热循环条件下提供重现性高、准确的 qPCR 检测结果。为了生产冻干的常温稳定 qPCR 试剂,必须在冻干前添加 dNTP、MgCl2和不含甘油的 Taq DNA 聚合酶(如 MDX011 或 MDX015)。
规格
说明 | 不含甘油的 qPCR 反应缓冲液,含有冻干辅料。为了生产室温冻干的 qPCR 试剂,还需加入与冻干兼容的 Taq DNA 聚合酶、检测专用引物和探针,以便随后进行冻干。 |
浓度 | 2.5x |
外观 | 无色透明溶液 |
应用 | 快速 qPCR |
样品类型 | cDNA, DNA |
演示文稿 | 1 瓶 |
存储 | -20 °C |
混合稳定性 | 见外标签 |
一致性 | 测试样本和参照样本之间的 ± 0.5 Ct 差异 |
DNA 污染 | 在大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特异性目标的 PCR 扩增中未检测到与阴性对照重叠的痕迹。 |
DNase 污染 | 检测不到降解 |
目录和手册
常见问题:Lyo-Ready qPCR 混合液 2.5x
qPCR 效率低的原因是什么?
标准 10 倍稀释曲线的斜率表示 qPCR 效率。qPCR 的效率应在 90-110% 之间(-3.58 ≥ 斜率 ≥ -3.1)。如果效率大于 100%,说明样品和试剂的移液不准确;如果效率小于 100%,说明样品中可能含有 PCR 抑制剂,或者 qPCR 引物和/或探针的设计不够理想。
冻干混合物和液体混合物的反应条件是否相同?
是的,反应条件是相同的,即使是多重 qPCR 检测,它们也会产生相同的 Ct 值。这意味着,如果您不想冻干,可以使用液体混合物来创建 SOP,之后如果需要冻干(例如提高灵敏度),可以更新 SOP 以进行冻干,而不需要编写全新的 SOP。
qPCR 中可以使用哪些探针?
目前已设计出许多基于荧光 qPCR 引物和探针的化学试剂,并有不同的商业供应商提供用于分子诊断检测的试剂,其中最常用的两种试剂是:
– 水解(TaqMan)探针。使用水解探针的主要优点是特异性高、信噪比高,并能进行多重 qPCR 反应。缺点是探针的初始成本较高。
– 分子信标。分子信标具有高度特异性,可用于多重扩增,如果目标序列与信标序列不完全匹配,则不会发生杂交和荧光。与水解探针不同,分子信标在扩增过程中会发生位移,但不会被破坏,必要时可用于熔融曲线分析。分子信标的主要缺点是设计困难,需要有足够强的稳定发夹茎,使分子不会自发折叠成非发夹构象,但又不能太强,否则可能无法与目标物正确杂交。
Lyo-Ready qPCR 缓冲液 2.6x 能否用于粗样品?
2.6x 版 Lyo-Ready qPCR 缓冲液具有一定的抑制剂耐受性,但对于粗裂解液或抑制剂丰富的样品,我们建议使用优化的 Lyo-Ready Specimen-specific™ (血液、唾液、尿液、粪便和植物)qPCR 和 LAMP 混合液进行扩增。
冻干混合物在环境温度下能稳定多长时间?
无论有无引物和探针,冻干后的 Lyo-Ready qPCR 混合液在环境温度(17 – 23 °C)下至少可稳定 24 个月。再水化后,检测的重现性、灵敏度和稳健性将与新制成的液体混合物相同,使混合物成为床旁分子诊断检测和微流控 qPCR 设备的理想选择。
你们是否单独供应溶菌酶辅料?
如果您需要不含溶菌酶赋形剂的缓冲液,我们有不含赋形剂的 Lyo-Ready qPCR 缓冲液,4x (MDX061),但您需要自己提供赋形剂。
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