Meridian 的 MMLV-RT
- 灵敏度高，即使模板 RNA 的浓度很低
- 耐热性高达 45°C，适用于更具挑战性的转录本
- 高质量的第一链 cDNA，是大多数 RT-PCR 和 RT-qPCR 应用的理想选择
- 降低 RNase H 活性，提高产量
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说明
MMLV-RT 是一种高质量反转录酶，可从 mRNA 或总 RNA 合成互补 DNA (cDNA) 链。它具有更高的恒温性和更低的 RNase H 活性，可用于长信使 RNA 模板的合成，灵敏度高、效率高，是检测低水平目标基因的理想选择。
规格
| 说明 | MMLV-RT （Moloney Murine Leukemia Virus Reverse Transcriptase，莫隆尼鼠白血病病毒逆转录酶）用于 cDNA 合成和随后的 PCR 或 qPCR 一步法或两步法检测。 |
| 浓度 | 100x |
| 外观 | 无色透明溶液 |
| 应用 | cDNA 合成、RT-PCR、PCR、两步式 RT-qPCR、一步式 RT-qPCR |
| 样品类型 | 核糖核酸 |
| 演示文稿 | 1 瓶 |
| 存储 | -20 °C |
| 混合稳定性 | 见外标签 |
| 一致性 | 测试样本和参照样本之间的 ± 0.5 Ct 差异 |
| DNA 污染 | 在大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特异靶标的 PCR 扩增中未检测到与阴性对照重叠的痕迹。 |
| DNase/RNase 污染 | 未检测到降解 |
目录和手册
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常见问题：MMLV-RT
我想从二级结构非常高的病毒 RNA 中生成 cDNA，可以使用 MMLV-RT 吗？
对于二级结构非常高的 RNA，我们建议使用 55C MMLV-RT (MDX117)，这种逆转录酶的使用温度可高达 60°C，从而提高了需要较高温度才能使二级结构变性的困难 RNA 目标的 cDNA 产量。
使用 MMLV-RT 可以提高产量吗？
避免核糖核酸酶污染是首要问题，因为需要高质量的模板 RNA。您可以添加 RNase 抑制剂 (MDX056)，或者我们也有 RNase-Tolerant MMLV-RT (MDX043)，其中包括 RNase 抑制剂。
您建议 MMLV-RT 使用哪种缓冲器？
如果要制作 cDNA，则需要含有 0.2 mM dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP、10 mM DTT（二硫苏糖醇）、25 mM KCl、3.5 mM MgCl2 和 50 mM Tris-HCl (7.5) 的缓冲液。但是，如果您想进行 RT-qPCR 操作，我们建议您使用 1 步 qPCR 缓冲液，4x (MDX034) 或 Lyo-Ready 1 步 RT-qPCR 缓冲液 (MDX052)。
MMLV-RT 如何失活？
可通过添加 EDTA 等螯合剂或加热至 70°C 或更高温度 10 分钟来灭活逆转录酶。
MMLV-RT 是否需要底漆？
是的，为了启动反转录，MMVL-RT 反转录酶需要引物与其 RNA 模板上的互补序列结合，作为合成新链的起点。对于一般的 cDNA 合成，随机六聚体引物和寡聚（dT）引物既可单独使用，也可混合使用。对于 RT-PCR 和 RT-qPCR，应使用基因特异性引物。
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