Meridian 的耐 RNase MMLV-RT
- cDNA 合成灵敏度高，模板 RNA 浓度低也能合成
- 温度范围更广，最高可达 50°C，适用于更具挑战性的转录本
- 在样品可能含有抑制剂的情况下效率高
- 高质量的第一链 cDNA 合成，是大多数一步式 RT-qPCR 的理想选择
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说明
耐 RNase MMLV-RT 不抑制聚合酶或反转录酶的活性，因此可用于 cDNA 合成或一步 RT-qPCR 反应。耐 RNase MMLV-RT 适用于任何可能存在 RNase 问题的应用。
规格
| 产品描述 | RNase-Tolerant MMLV-RT（莫洛尼鼠白血病病毒逆转录酶）用于检测极低水平的 RNA，也可在更宽的温度范围内使用，是血库或移植病毒检测等应用的理想选择。 |
| 浓度 | 100x |
| 外观 | 无色透明溶液 |
| 应用 | cDNA 合成、RT-PCR、PCR、两步式 RT-qPCR、一步式 RT-qPCR |
| 样品类型 | 核糖核酸 |
| 演示文稿 | 1 瓶 |
| 存储 | -20 °C |
| 混合稳定性 | 见外标签 |
| 一致性 | 测试样本和参照样本之间的 ± 0.5 Ct 差异 |
| DNA 污染 | 在大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特异靶标的 PCR 扩增中未检测到与阴性对照重叠的痕迹。 |
| DNase/RNase 污染 | 未检测到降解 |
目录和手册
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常见问题耐 RNase MMLV-RT
我想使用二级结构非常高的病毒 RNA 进行 cDNA 合成，可以使用 RNase-Tolerant MMLV-RT 吗？
对于二级结构非常高的 RNA，我们建议使用 55C MMLV-RT (MDX117)，这是一种不含甘油的反转录酶，可在高达 60°C 的温度下使用，可提高困难 RNA 目标的 cDNA 产量，因为这些目标需要更高的温度来变性强二级结构。您可以添加 RNase 抑制剂 (MDX056) 来提高 RNase 的耐受性。
您建议使用哪种缓冲液来处理 RNase-Tolerant MMLV-RT？
如果要制作 cDNA，则需要含有 0.2 mM dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP、10 mM DTT（二硫苏糖醇）、25 mM KCl、3.5 mM MgCl2 和 50 mM Tris-HCl (7.5) 的缓冲液。但是，如果您想进行 RT-qPCR，我们推荐使用 1-Step RT-qPCR Buffer (MDX034)。
耐 RNase MMLV-RT 如何失活？
可通过添加 EDTA 等螯合剂或加热至 70°C 或更高温度 10 分钟来灭活逆转录酶。
耐 RNase 的 MMLV-RT 是否需要引物？
是的，要启动 cDNA 合成，耐 RNase MMLV-RT 逆转录酶需要引物与其 RNA 模板上的互补序列结合，作为合成新链的起点。对于一般的 cDNA 合成，随机六聚体引物和寡聚（dT）引物既可单独使用，也可混合使用。对于 RT-PCR 和 RT-qPCR，应使用基因特异性引物。
RNase-Tolerant MMLV-RT 的错误率是多少？
与真核生物复制聚合酶不同，逆转录酶缺乏外切酶活性，因此容易出错。据报道，基于 MMLV 的反转录酶的错误率在 1.1 ×10-4到 4.8 ×10-4 之间。
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