使用引物和 Taq DNA 聚合酶对人类基因组 DNA 进行一式两份的序列稀释（分别为 1 μg、200 ng、100 ng、50 ng、25 ng 和 12.5 ng，1-6），以扩增人类 myc 基因的 450 bp 片段。所用基因片段的 GC 含量为 61%，选择该片段是为了展示 Taq DNA 聚合酶的高产率和灵敏度，使其成为扩增复杂 PCR 模板的最佳选择。
Taq PCR 缓冲液结合了缓冲液化学领域的最新进展以及最佳浓度的增强剂、稳定剂、dNTPs 和MgCl2。Taq PCR 缓冲液专为在各种模板上进行卓越的快速扩增而设计。
| 说明 | 经过优化的新型缓冲体系，含有 dNTPs、MgCl2和增强剂，可提供卓越的扩增效果，是复杂模板的最佳选择。 |
| 浓度 | 5x |
| 外观 | 无色透明溶液 |
| 应用 | PCR, qPCR |
| 样品类型 | cDNA, DNA |
| 演示文稿 | 1 瓶 |
| 存储 | -20 °C |
| 混合稳定性 | 见外标签 |
| 功能 | 使用人类基因组 DNA 稀释系列进行 PCR，观察到单个明显的条带 |
| DNA 污染 | 在大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特异性目标的 PCR 扩增中未检测到与阴性对照重叠的痕迹。 |
| DNase 污染 | 检测不到降解 |
Taq DNA 缓冲液已经过验证，可用于多种 PCR 模板，包括从人类、动物和植物样本中提取的 DNA，因此是以下应用的理想选择：
– 终点 PCR 检测
– 高产 PCR 检测
– 快速 PCR 检测
– 多重 PCR 检测
对于 qPCR，我们建议使用快速 qPCR 缓冲液，4x (MDX033)，因为它已针对此应用进行了优化。
这取决于所用的聚合酶以及扩增片段的长度和模板的复杂程度。对于快速 PCR，使用 Taq HS DNA 聚合酶（MDX008），初始变性时间为 1 分钟，但对于低复杂度模板（如质粒 DNA），退火时间为 5 秒，延伸时间为 10 秒，对于 1 kb 以下的扩增子就足够了。为了找到最快的最佳条件，对于更复杂或更长的扩增片段，我们建议逐步增加延伸时间，直至 30 秒/kb。
降低模板浓度有助于最大限度地减少抑制剂的浓度，也可以增加 DNA 聚合酶和引物的用量。在某些情况下，如果无法获得 DNA，可能还需要增加一个预处理步骤。
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